АПСр

Резистентность активированного фактора V (фактор V Leiden) к действию активированного протеина С (АПСр)

Действие противосвертывающей системы протеина С (протеин С — протеин S – тромбомодулин – тромбин* — ингибитор протеина С) направлено преимущественно на ингибирование факторов VIIIа и Vа, а также на инактивацию ингибитора активатора плазминогена (PAI-1). Нарушения в системе протеина С вызывают тромбозы различной локализации.

*В этом комплексе тромбин выступает в роли активатора протеина С.

О резистентности активированного фактора V к действию протеина C  было впервые сообщено в литературе шведскими учеными в 1993 году. Примерно 95% АПСр связано с мутацией фактора V Лейден (Leiden) — мутацией G1691A (FVL Arg506Gln), которая приводит к невозможности расщепления и инактивации фактора Va (и фактора VIIIa) активированным протеином С. Мутация фактора V Лейден наследуется по аутосомно-доминантному типу, частота встречаемости в популяции по данным различных исследований — 0,1-5%. Среди больных с венозными тромбозами мутация V Лейден обнаруживается у 25-40%.

В результате данной наследственной тромбофилии повышается активация свертывания крови, что приводит к развитию тромбозов периферических вен, вен сетчатки глаза, инфарктов миокарда, тромбоэмболии легочной артерии и пр.

Принцип метода скрининга на АПСр, основанный на анализе АЧТВ смеси исследуемой и дефицитной по ф.V плазм:

Инкубация смеси нормальной и дефицитной плазм с активатором (ядом щитомордника Agkistrodon сontortrix) вызывает активацию эндогенного протеина С и протеина S, что удлиняет время свертывания нормальной плазмы в тесте АЧТВ.

В плазме больных с АПСр, в том числе, при наличии мутантного фактора V Лейден, удлинение АЧТВ при добавлении активатора менее выражено, чем в норме (см.инструкцию к РеаЛейден – тесту).

При проведении анализа определяют 4 показателя:

• АЧТВ смешанной плазмы-калибратора без активатора;
• АЧТВ смешанной плазмы-калибратора с активатором;
• АЧТВ смешанной плазмы больного без активатора;
• АЧТВ смешанной плазмы больного с активатором

Результаты теста принято выражать в виде Нормализованного Отношения (НО):

, где: НОкалибр – Нормализованное Отношение плазмы-калибратора.

Помимо теста описанного выше, в лабораторной практике используются:

— тесты, основанные на применении АПС и активаторов ф.V, выделенных из ядов змей;

— хромогенный анализ, основанный на способности АПС ограничивать генерацию ф.Xа путем инактивации ф.VIIIа в плазме;

— тест, основанный на разбавленном DRVVT.

Тест в идеале должен дифференцировать пациентов без АПСр от лиц, которые являются гетерозиготными или гомозиготными по мутации фактора V Лейден.

Окончательное подтверждение наличия мутации V Лейдена может быть сделано при помощи ПЦР-диагностики.

Референсные значения

У здоровых лиц НО составляет 1.1± 0.3 (М ± 2s).

Диапазон нормальных величин очень сильно зависит от конкретного используемого лабораторного теста.

Интерпретация результатов:

Значение НО ниже 0,8 свидетельствует о возможном наличии мутантного фактора V Лейден, резистентного к действию активированного протеина С. Ложноположительные результаты могут быть получены при анализе образцов плазм больных:

• с повышенным содержанием нефракционированного гепарина;
• с наличием системной красной волчанки
• при использовании антикоагулянтов непрямого действия (МНО выше 3.0).

Что надо знать о АПСр:

1. Предполагают, что единичная мутация гена, кодирующего ф.V, произошла около 30 000 лет назад.
2. Мутация V Лейден обнаруживается в подавляющем преимуществе у лиц европеоидной расы.
3. Наряду с вышеописанными эффектами мутации V Лейден присутствует влияние мутации на фибринолиз.

При подготовке раздела использованы данные научного сайта www.practical—hemostasis.com.