Ренапарин-тест

РЕНАПАРИН-тест (контроль фармацевтических препаратов)

Набор реагентов для определения активности низкомолекулярного гепарина

Набор реагентов для определения анти-Ха и анти-IIа активности низкомолекулярного гепарина (Ренапарин-тест) предназначен для количественного определения анти-Ха и анти-IIa активности в препаратах и субстанциях низкомолекулярного гепарина (НМГ) с использованием хромогенных субстратов.

Принцип метода:
Метод определения активности НМГ основан на способности комплекса антитромбин III-гепарин (АТ III-НМГ) нейтрализовать активированные факторы Ха и IIa.
Активность НМГ в препаратах и субстанциях определяют, добавляя к ним избыток антитромбина III и фактора Xa или IIa. При этом происходит ингибирование факторов Xa или IIa комплексом АТ III-НМГ пропорционально количеству НМГ в препарате или субстанции. Оставшееся количество фактора Xa или IIa катализирует отщепление паранитроанилина (рNА) от синтетических хромогенных субстратов. Абсорбция свободного pNA, определяемая при длине волны 405 нм, обратно пропорциональна анти-Ха или анти-IIa активностям НМГ.
Процесс идет по следующим схемам:
1. При определении анти-Ха активности НМГ:

АТ III (избыток) + НМГ ⇒ АТ III-НМГ.

АТ III-НМГ + фактор Xa (избыток) ⇒АТ III-НМГ-Xa + фактор Xa (остаток).

Фактор Xa (остаток) + фактор Xa-Субстрат-рNA ⇒Пептид + рNA.

2. При определении анти-IIа активности НМГ:

АТ III (избыток) + НМГ⇒АТ III-НМГ.

АТ III-НМГ + фактор IIa (избыток) ⇒ АТ III-НМГ-IIa + фактор IIa (остаток).

Фактор IIa (остаток) + фактор IIa-Субстрат-рNA ⇒Пептид + рNA.