Реахром-Гепарин

ГП-1                   

ГП-1/1                                                     

Инструкция (ГП-1)                        Регистрационное удостоверение (ГП-1)

Инструкция (ГП-1/1)                    Регистрационное удостоверение (ГП-1/1)

Набор реагентов для определения анти Ха активности гепарина оптическим методом (Реахром-гепарин) по ТУ 9398-032-05595541-2011 (ГП-1) ∗

Набор реагентов для определения
анти-Ха активности гепарина хромогенным методом
(Реахром-гепарин) по ТУ 21.20.23-073-05595541-2021 (ГП-1/1) ∗∗

Наборы предназначены для мониторинга за введением гепарина (в том числе низкомолекулярного) путем определения его анти Ха активности в плазме крови.

∗Набор ГП-1 предназначен для автоматических, полуавтоматических анализаторов, а также при ручном методе определения анти-Ха активности.

∗∗Набор ГП-1/1 — только для автоматических коагулометров. Все компоненты данного набора упакованы во флаконы с завинчивающимися крышками. Улучшенный хромогенный субстрат, входящий в состав набора позволяет использовать данный набор в том числе и на стандартных протоколах без внесения дополнительных изменений.

Мониторинг за введением гепарина позволяет в первую очередь не допустить геморрагических осложнений и в тоже время оценить эффективность антикоагулянтной терапии.

Принцип метода:
Метод определения активности гепарина основан на способности комплекса АТ III-гепарин нейтрализовать активированный фактор Ха. Активность гепарина определяют в плазме, добавляя к ней избыток AT III и фактора Xa. При этом происходит ингибирование фактора Xa комплексом АТ III-гепарин пропорционально количеству гепарина в плазме. Оставшееся количество фактора Xa катализирует отщепление пара-нитроанилина (рNА) от синтетического хромогенного субстрата. Абсорбция свободного pNA, определяемая при длине волны 405 нм, обратно пропорциональна активности гепарина в плазме.
Процесс идет по следующей схеме:

АТ III (избыток) + гепарин →АТ III-гепарин.

АТ III-гепарин + Xa (избыток)→АТ III-гепарин-Xa+Xa (остаток).

Субстрат-рNA + Xa (остаток) ⇒Пептид + рNA.

Для построения калибровочного графика используют плазмы-калибраторы с известными активностями гепарина, указанными в паспорте медицинского изделия. На оси ординат (Y) по линейной шкале отложить величины оптической плотности, полученные для каждой плазмы-калибратора, а на оси абсцисс (Х) по линейной шкале отложить активность гепарина в антиXa ед/мл плазмы. Правильность построения калибровочного графика проконтролировать с помощью контрольных плазм.

Состав набора ГП-1:
•   Антитромбин III, лиофильно высушенный (1 мл/фл.) – 2 флакона;

•     Фактор Xa, лиофильно высушенный (2 мл/фл.) – 2 флакона;

•    Хромогенный субстрат, лиофильно высушенный (2 мл/фл.) – 2 флакона;

•    Буфер концентрированный (5 мл/фл.) – 2 флакона;

•    Плазмы-калибраторы (1 мл/фл.) — 3 флакона;

•    Плазмы контрольные (1 мл/фл.) — 2 флакона.

Один набор ГП-1 предназначен для проведения 20 определений при расходе реагентов по 0,2 мл ручным методом или 80 определений при расходе реагентов по 0,05 мл планшетным методом.

Число определений с помощью набора Реахром-гепарин ГП-1/1 зависит от типа используемого коагулометра.

Состав набора ГП-1/1:

•   Антитромбин III, лиофильно высушенный (1,0 МЕ во фл.) – 2 флакона;

•   Фактор Xa, лиофильно высушенный (15,0 нкат во фл.) – 4 флакона;

•   Хромогенный субстрат, лиофильно высушенный (3,0 мкМ во ф.) – 2 флакона;

•   Буфер имидазоловый – 5,0 мл во флаконе – 1 флакон;

•   Плазма-калибратор уровень 0, лиофильно высушенная (объем после восстановления 1,0 мл во фл.) – 1 флакон;

•   Плазма-калибратор уровень 1, лиофильно высушенная(объем после восстановления 1,0 мл во фл.) – 1 флакон;

•   Плазма-калибратор уровень 2, лиофильно высушенная (объем после восстановления 1,0 мл во фл.) – 1 флакон;

•   Плазма контрольная уровень 1, лиофильно высушенная – объем после восстановления      1,0 мл, во флаконе – 1 флакон.

•   Плазма контрольная уровень 2, лиофильно высушенная (объем после восстановления 1,0 мл во фл.) – 1 флакон.

Анти-Ха активность гепарина в плазмах-калибраторах составляет:

уровень 0 – 0 МЕ/мл; уровень 1 – 0,4 – 0,7 МЕ/мл; уровень 2 – 0,8 – 1,2 МЕ/мл.

Анти-Ха активность гепарина в плазмах контрольных составляет:

уровень 1 – 0,4 – 0,7 МЕ/мл; уровень 2 – 0,8 – 1,2 МЕ/мл.

Интерпретация результатов:

При введении гепарина в профилактических целях его анти-Ха активность в плазме крови должна составлять 0,3 – 0,7 МЕ/мл.

При введении гепарина в терапевтических целях его анти-Ха активность в плазме крови должна составлять 0,7 – 1,2 МЕ/мл